Los anticuerpos de control de carga son controles importantes, ya que indican la misma carga de muestras en todos los pocillos. Los controles de carga también indican la transferencia adecuada de proteínas a la membrana durante el proceso de transferencia Western. Los controles de carga suelen ser proteínas con una expresión alta y ubicua.
¿Qué hace un control de carga?
Un control de carga es una proteína utilizada como control en un experimento de transferencia Western. … Se para asegurarse de que la proteína se haya cargado por igual en todos los pocillos.
¿Por qué usamos un control de carga en Western blot?
Los controles de carga tienen un segundo papel como control en los western blot. Se pueden utilizar para comprobar que se ha producido una transferencia uniforme del gel a la membrana en todo el gel. Esto es imperativo cuando se realizan comparaciones de los niveles de expresión de proteínas entre muestras.
¿Cómo se usa el control de carga en Western blot?
Las señales de los controles de carga se utilizan normalmente para normalizar las señales de las proteínas de interés. Para usar un control de carga para estos fines, la detección con el anticuerpo de proteína de control y el anticuerpo experimental deben realizarse en la misma transferencia. Se utiliza una variedad de proteínas diferentes como controles de carga.
¿Por qué se utiliza la actina como control de carga?
Beta-actina, generalmente se usa como control de carga para Western Blot paranormalice los niveles de proteína detectados confirmando que la carga de proteína es la misma en todo el gel.