Los datos de densitometría generados para Western blot se comúnmente utilizados para comparar la abundancia de proteínas entre muestras. … Se observaron datos de densitometría no lineal cuando se detectaron transferencias Western usando fluorescencia infrarroja o quimioluminiscencia, y bajo diferentes condiciones de SDS-PAGE.
¿Qué es el análisis densitométrico?
La densitometría es la medición cuantitativa de la densidad óptica en materiales sensibles a la luz, como papel fotográfico o película fotográfica, debido a la exposición a la luz.
¿Cómo se usa la densitometría en la imagen J?
Densitometría usando ImageJ
- Haz clic en el centro del cuadrado y arrástralo hasta el siguiente carril. …
- Para el último carril, repita el procedimiento pero presione Ctrl y 3 para establecer el último carril. …
- Use la herramienta de línea para dibujar las líneas y eliminar el fondo del carril de los cálculos. …
- Ir a: Analyse→Gels→Label Peaks para obtener el informe.
¿Cómo se analizan los resultados del western blot?
Valide sus herramientas de cuantificación . Por ejemplo, ejecute una transferencia donde los carriles estén cargados con 20 µg, 15 µg y 10 µg de proteína total. Después del análisis, la cuantificación relativa de las bandas objetivo debe ser 2, 1,5 y 1. Pruebe diferentes herramientas y configuraciones de cuantificación hasta que pueda reproducir de manera confiable los resultados correctos.
¿Cómo se cuantifica un western blot?
Paso 1: Determinar el fondo sustraídodensidades de su proteína de interés (PI) y el control de normalización (NC). Paso 2: Identifique el NC que tiene el valor de densidad más alto. Paso 3: divida todos los valores de NC por el valor de densidad de NC más alto para obtener un valor de NC relativo.
