Incube el recipiente a temperatura ambiente durante 2-3 minutos . Las células firmemente adheridas se pueden separar rápidamente a 37 °C. Observe las células bajo el microscopio. Las células separadas aparecen redondeadas y refráctiles bajo el microscopio.
¿Qué ocurre si se tripsinizan las células demasiado tiempo?
Incubar células con una concentración de tripsina demasiado alta durante un período de tiempo demasiado largo dañará las membranas celulares y matará las células. Si no está seguro de la concentración de tripsina que debe usar, use una concentración baja.
¿Cómo se tripsinizan las células?
Las células se pueden resuspender pipeteando suavemente la suspensión celular para romper los grumos. Si es necesario, se puede realizar una dilución adicional para el recuento de células y/o el subcultivo.
¿Cuánto tardan las células en adherirse?
¡Las primeras celdas ya se adhieren después de 3-5 min! En mi experiencia, la mayoría de los EC se adhirieron después de 10 a 20 minutos. Pero cuanto más esperas, más firme es el apego.
¿Es malo tratar las células con tripsina dos días seguidos?
Sí, es dañino si usted está tripsinizando sus células continuamente después de 24 horas de división. Es recomendable hacer la división después de 48 horas de división. … Puede mantener las células hasta que la morfología sea buena (depende de su tipo de célula, algunas células pueden tener hasta 80 pasajes y otras hasta 10).
