Cuanto mayor es el peso molecular, más larga es la bobina y más lenta va la molécula. Por lo tanto, electroforesis + SDS se separa sobre la base del peso molecular, no sobre la base de la carga nativa. Nota importante: las proteínas de la misma longitud normalmente no se pueden separar mediante electroforesis en gel + SDS.
¿Cómo se separan las proteínas del mismo peso molecular?
La centrifugación, la electroforesis y la cromatografía son las técnicas más comunes para purificar y analizar proteínas. La centrifugación separa las proteínas en función de su tasa de sedimentación, que está influenciada por su masa y forma.
¿Qué técnicas separan las proteínas en función de la carga?
Las proteínas se pueden separar en función de su carga neta mediante cromatografía de intercambio iónico. Si una proteína tiene una carga neta positiva a pH 7, por lo general se unirá a una columna de perlas que contienen grupos carboxilato, mientras que una proteína con carga negativa no lo hará (Figura 4.4).
¿Cuál de las siguientes técnicas es la más adecuada para separar proteínas en función del peso molecular?
Los métodos de cromatografía basados en partición son muy efectivos en la separación e identificación de moléculas pequeñas como aminoácidos, carbohidratos y ácidos grasos. Sin embargo, las cromatografías de afinidad (es decir, la cromatografía de intercambio iónico) son más eficaces en la separación de macromoléculas como ácidos nucleicos y proteínas.
Qué tipo de columnala cromatografía separa las proteínas en función del peso molecular?
La cromatografía de filtración en gel (GF) separa las proteínas únicamente en función del tamaño molecular. La separación se logra utilizando una matriz porosa a la que las moléculas, por razones estéricas, tienen diferentes grados de acceso, es decir, las moléculas más pequeñas tienen mayor acceso y las moléculas más grandes quedan excluidas de la matriz.