Sin embargo, cuando los espectros de emisión se superponen, se puede detectar la fluorescencia de más de un fluorocromo. Para corregir esta superposición espectral, se utiliza un proceso de compensación de fluorescencia. Esto asegura que la fluorescencia detectada en un detector en particular se deriva del fluorocromo que se está midiendo.
¿Por qué necesitamos una compensación en la citometría de flujo?
Se requiere compensación para un experimento de citometría de flujo debido a la física de la fluorescencia. Un fluorocromo se excita y emite un fotón en un rango de longitudes de onda. Algunos de esos fotones se vierten en un segundo detector, lo que hace que las muestras teñidas individuales parezcan doblemente positivas.
¿Cuál es el propósito principal de usar una celda de compensación?
El propósito principal es permitir la medición de la verdadera fluorescencia en el canal principal contaminado por el derrame de los fluoróforos vecinos. Por lo tanto, la compensación corrige el "traspaso" de fluorescencia entre fluoróforos. Sin embargo, no es perfecto y no puede corregir todos los efectos indeseables.
¿Qué es la matriz de compensación?
Una matriz de compensación se calcula usando archivos de control fluorescente de un solo color que se recopilan en ImageStream o FlowSight con todos los canales recopilados y en ausencia de iluminación de campo claro o SSC.
¿Qué es la compensación espectral?
Uso espectralla compensación significa que la señal de los detectores no primarios todavía se usa para mejorar la verdadera señal de los marcadores siempre que sea posible. Las muestras de control primario se utilizan para la denominación de parámetros. … Las muestras utilizadas para detectores primarios también ayudan a nombrar esos parámetros después de la compensación espectral.
